目的：建立广地龙饮片及其2种常见伪品的HPLC特征图谱并测定其中尿嘧啶、次黄嘌呤、黄嘌呤、腺苷、肌苷的含量，为广地龙饮片的真伪鉴别和质量控制提供参考。方法：采用Thermo TSK-GEL C₁₈色谱柱（4.6 mm×250 mm，5 μm），以0.1%甲酸水溶液-甲醇（99：1）为流动相，等度洗脱40 min，流速为1.0 mL·min^-1，检测波长260 nm，柱温30℃，进样量10 μL。采用"中药色谱指纹图谱相似度评价系统"建立指纹图谱并进行相似度评价，并对尿嘧啶，次黄嘌呤，黄嘌呤，腺苷和肌苷的含量测定进行方法学考察。结果：建立了广地龙饮片及其伪品的特征图谱，正品（参环毛蚓）中标定了7个共有峰，伪品大腔蚓和暗孔远盲蚓中均标定了8个共有峰。对不同来源的广地龙饮片及其伪品中5个核苷成分进行含量测定。尿嘧啶、次黄嘌呤、黄嘌呤、腺苷、肌苷线性范围分别为3.40~170、4.40~220、5.00~250、3.40~170、4.20~210 μg·mL^-1，线性关系良好（r ≥ 0.999 9）；重复性和稳定性的RSD均<3.0%，平均加样回收率在95.5%~107.0%之间。18批广地龙饮片中均未检测到腺苷，尿嘧啶、次黄嘌呤、黄嘌呤、肌苷含量分别为0.021~0.408、0.309~6.133、0.825~4.714和1.413~23.382 mg·g^-1。结论：所建立特征图谱专属性强，结合5个主要成分含量测定，能够为广地龙饮片的真伪鉴别和质量控制提供科学依据。