目的：建立高效液相色谱法测定1种酰氯类化合物5-氯噻吩-2-甲酰氯。方法：采用Ameritech Accurasil C₈（250 mm×4.6 mm，5μm）色谱柱，以0.01 mol·L^-1磷酸水溶液为流动相A，乙腈为流动相B进行梯度洗脱，流速1.0 mL·min^-1，柱温35℃，检测波长274 nm；以无水甲醇为衍生化试剂，三乙胺为缚酸剂，经衍生后进样测定。结果：5-氯噻吩-2-甲酰氯含量检测方法的专属性好；在1.012~2.040 mg·mL^-1浓度范围内线性良好r=0.998 2，n=5；精密度、溶液稳定性好，RSD分别为0.040%（n=6）和1.2%（n=7）；平均回收率（n=9）为99.0%，RSD为0.80%；色谱条件发生微小变化时，方法耐用性好；5-氯噻吩-2-甲酸的定量下限和检测下限分别为1.871 μg·mL^-1和0.623 7 μg·mL^-1，5-氯噻吩-2-甲酰氯的定量下限和检测下限分别为1.562 μg·mL^-1和0.468 6 μg·mL^-1；3批供试品中特定杂质和最大单一未知杂质含量均小于1.0%，主成分含量分别为98.5%、98.4%、98.4%。结论：本方法适用于5-氯噻吩-2-甲酰氯的测定，对于其他酰氯类化合物的测定也有重要的参考价值。