目的：建立高效液相色谱手性固定相法拆分硫康唑、咪康唑、益康唑、异康唑和芬替康唑5个抗真菌药物对映体，探讨其分离机制，得到理想的拆分条件。方法：采用Chiralcel OJ-H手性色谱柱，检测波长为230 nm，柱温为25℃，流速为1.0 mL·min^-1，进样量为20 μL；以保留时间（t）、选择因子（α）和分离度（R）为指标，考察流动相中有机改性剂的种类（乙醇、异丙醇）及其占比等对5个药物对映体分离的影响。硫康唑、咪康唑和异康唑流动相组成为正己烷-乙醇（80∶20， v/v）；选择分离益康唑流动相组成为正己烷-乙醇（60∶40， v/v）；选择分离芬替康唑流动相组成为正己烷-乙醇（20∶80， v/v）。结果：硫康唑、咪康唑、益康唑、异康唑和芬替康唑5个药物的对映体均达到完全分离，分离度分别为2.83、4.23、5.96、4.61、4.84。结论： Chiralcel OJ-H手性色谱柱HPLC法对这5个康唑类药物选择性良好，可用于其对映体的手性分离。