目的：建立拉莫三嗪原料药有关物质的HPLC测定方法。方法：采用FeiniGen RedClassical Ⅱ C₁₈（250 mm×4.6 mm，5 μm）色谱柱，对拉莫三嗪的有关物质进行定量分析，以磷酸二氢钾缓冲液（取磷酸二氢钾2.7 g，加水800 mL使溶解，加三乙胺6.7 mL，用磷酸调节pH至2.0，加水至1 000 mL）为流动相A，乙腈为流动相B，梯度洗脱，流速为1.5 mL·min^-1，柱温为35℃，检测波长为210 nm（用于检测2，3-二氯苯甲酸）和270 nm（用于检测除2，3-二氯苯甲酸外的其他杂质）。用HPLC-MS鉴定氧化降解溶液中未知杂质；采用Thermo Acclaim^TM 120 C₁₈（250 mm×4.6 mm，5 μm）色谱柱，以甲醇-水（50∶50）为流动相，ESI离子源，正离子扫描方式，检测离子m/z为272。结果：主峰与各有关物质峰分离度良好，拉莫三嗪及各有关物质在质量浓度为0.3~4.0 μg·mL^-1范围内呈良好的线性关系（r²=0.998 7），拉莫三嗪的定量下限为0.2 μg·mL^-1（270 nm）、杂质Ⅰ的定量下限为0.2 μg·mL^-1（210 nm）。3批样品有关物质测定结果显示，已知杂质和未知杂质均未检出。结论：本法可为拉莫三嗪质量控制提供参考。