目的： 建立HPLC法测定蒙药小秦艽花中大麦黄苷、马钱苷、肥皂草苷、异荭草苷和异牡荆苷的含量。方法： 采用Symmetry? C₁₈色谱柱（4.6 mm×250 mm，5.0 μm），以乙腈（A）-0.1%甲酸水溶液（B）为流动相，梯度洗脱，流速为1.0 mL· min^-1，柱温35℃，检测波长为245 nm和330 nm。结果： 大麦黄苷、马钱苷、肥皂草苷、异荭草苷和异牡荆苷5个成分的进样量分别在0.124~2.484 μg（r=0.999 3）、0.127~2.540 μg（r=1.000）、0.015~0.302 μg（r=0.999 9）、0.112~2.396 μg（r=1.000）、0.024~0.482 μg（r=0.999 7）范围内线性关系良好；平均回收率（n=3）在96.5%~102.8%范围内，RSD为0.88%~2.8%。16批小秦艽花样品中大麦黄苷、马钱苷、肥皂草苷、异荭草苷和异牡荆苷的含量范围分别为1.15~7.71、0.38~9.23、0.13~0.86、1.11~7.46、0.59~1.70 mg·g^-1。结论： 该方法可以用于小秦艽花中5个活性成分的含量测定，为小秦艽花药材的资源开发提供科学依据。