目的： 建立骨刺消痛胶囊的HPLC特征图谱，并对其5个主要成分（龙胆苦苷、甘草苷、丹皮酚、欧前胡素、异欧前胡素）进行含量测定，通过对不同企业骨刺消痛胶囊的研究，建立全面而统一的质量控制方法。方法： 采用C₁₈色谱柱（4.6 mm×250 mm，5 μm），以乙腈（A）-水（B）为流动相进行梯度洗脱，流速1.0 mL·min^-1，柱温为25℃，检测波长为274 nm（1~40 min，龙胆苦苷、甘草苷、丹皮酚）和254 nm（40.01~70 min，欧前胡素、异欧前胡素）。建立骨刺消痛胶囊HPLC特征图谱，同时测定5个主要成分的含量。结果： 通过对21个厂家骨刺消痛胶囊的HPLC特征图谱进行研究，确定了12个共有峰，经过归属验证，指认其中6个特征成分，分别为龙胆苦苷（4号峰）、甘草苷（5号峰）、丹皮酚（7号峰）、欧前胡素（8号峰）、蒿本内酯（9号峰）、异欧前胡素（12号峰）。利用相似度评价软件对各批次样品特征图谱进行分析，相似度均在0.90以上。在建立的色谱条件下对其中5个主要成分进行测定，各组分间分离度良好，方法精密度和重复性RSD均<2.0%，供试品溶液在24 h内稳定，龙胆苦苷、甘草苷、丹皮酚、欧前胡素、异欧前胡素进样量分别在0.110 1~1.101、0.007 2~0.071 8、0.074 9~0.748 7、0.007 7~0.076 6、0.003 0~0.030 1 μg范围内线性关系良好，加样回收率分别为103.4%、87.6%、84.7%、94.6%和96.3%。20批骨刺消痛胶囊中上述5个成分的含量分别为1.322~2.453、0.032~0.222、1.208~1.572、0.052~0.313和0.028~0.109 mg·g^-1。结论： 所建立的骨刺消痛胶囊HPLC特征图谱和定量测定分析方法可全面有效地评价该制剂的质量。