目的： 建立清热明目茶HPLC指纹图谱并测定清热明目茶中绿原酸、橙黄决明素、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚、大黄酸、芦荟大黄素的含量，为清热明目茶的质量控制提供参考。方法： 采用Hypersil Gold C₁₈（250 mm×4.6 mm，5μm）色谱柱；以乙腈（A）-0.5%磷酸水溶液（B）为流动相，梯度洗脱（0~12 min，15% A；12~20 min，15% A→28% A；20~36 min，28% A→40% A；36~50 min，40% A→50% A；50~60 min，50% A→55% A；60~68 min，55% A→62% A；68~74 min，62% A→85% A；74~90 min，85% A→15% A），流速：1.0 mL·min^-1；检测波长为327 nm（0~20 min，检测绿原酸）和287 nm（20~80 min，检测橙黄决明素、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚、大黄酸、芦荟大黄素）；柱温28℃，进样量10 μL。通过相似度评价结合聚类分析对12批次清热明目茶指纹图谱进行质量评价，并对指认的7个指标成分进行定量测定研究。结果： 建立了清热明目茶的指纹图谱，标定了21个共有峰，12批清热明目茶与对照图谱的相似度均≥ 0.94，聚类分析将其分为3类。绿原酸、橙黄决明素、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚、大黄酸、芦荟大黄素的线性范围分别为0.041 6~0.416 4 μg、0.386 2~3.862 2 μg、0.180 6~1.805 9 μg、0.209 8~2.097 7 μg、0.040 1~0.400 8 μg、0.100 1~1.001 3 μg、0.108 1~1.080 5 μg，线性关系良好（r ≥ 0.999 4）；重复性试验RSD<1.5%，平均加样回收率在98.9%~104.2%。12批样品中上述7个成分的含量范围分别为0.410 3~0.451 3、2.314 1~2.365 6、1.186 3~1.216 9、1.890 1~1.959 1、0.410 8~0.423 4、0.631 8~0.653 7和0.588 9~0.616 8 mg·g^-1。结论： 所建立的清热明目茶HPLC指纹图谱检测和定量分析方法准确可靠，专属性强，灵敏度高，能全面反映其内在质量，可用于清热明目茶的质量控制。