目的： 采用高效液相色谱（HPLC）-DAD-ESI-MSⁿ联用技术分析双黄连注射液中化学成分。方法： 采用Phenomenex Luna C₁₈色谱柱（250 mm×4.60 mm，5 μm），以甲醇-10 mmol·L^-1乙酸铵为流动相，梯度洗脱，流速1.0 mL·min^-1，检测波长254 nm，柱温30℃；采用电喷雾离子源（ESI）正负离子模式检测，质谱扫描m/z 100~1 500。对双黄连注射液的氯仿、乙酸乙酯、正丁醇和水4个溶剂萃取部位的化学成分进行分析。结果： 利用多级质谱信息，结合对照品对照及文献数据分析，初步确定了注射液中22个成分的结构，包括3种糖类成分，3种奎宁酸类成分，4种苯乙醇苷类成分，6种木脂素类成分，3种黄酮苷类成分，1种三萜皂苷类成分和2种其他类成分。结论： HPLC-DAD-ESI-MSⁿ联用技术对于中药注射液物质基础的研究有较好的应用价值。