目的： 建立毛细管电泳-激光诱导荧光（CE-LIF）检测方法，对重组人1型单纯疱疹病毒（rHSV-1）的DNA限制性酶切片段进行分析。方法： 以rHSV-1为研究对象，用核酸提取仪提取其DNA，以DNA限制性内切酶Nde Ⅰ酶切，以SYBR^TM Gold nucleic acid作为荧光标记物，利用CE-LIF实现分离检测，通过DNA ladder计算片段大小。CE-LIF条件：采用涂层毛细管（有效长度30 cm，总长度40 cm，内径100 μm），3.45 kPa压力进样3 s；毛细管分离温度设为25℃，毛细管分离电压为-7 kV，分离时间40 min；LIF检测器的激发波长及发射波长分别为488 nm和520 nm。结果： 新建方法可以对8个目标酶切片段分离检测，各片段峰迁移时间的RSD（n=6）均小于0.35%，片段峰1~7校正峰面积百分比的RSD（n=6）均小于5.6%，方法精密度良好。通过DNA ladder回归方程，对DNA酶切产物进行片段大小的计算，各片段大小计算结果RSD（n=6）均小于5.8%，且与琼脂糖凝胶电泳法测得结果相一致。结论： 本研究建立的rHSV-1的DNA限制酶酶切片段CE-LIF分析法自动化程度高，灵敏度高，重复性好，试剂消耗及环境污染小，适用于rHSV-1的鉴别分析。