目的： 建立牛痘病毒粒细胞巨噬细胞集落刺激因子（vaccinia virus/GM-CSF）注射液的生物学活性测定方法。方法： 采用噬斑法进行感染滴度测定，结合定量聚合酶链反应（quantitative polymerase chain reaction，Q-PCR）进行病毒基因组滴度/感染滴度测定；采用TF-1细胞增殖法，四参数方程拟合处理试验数据，检测不同浓度梯度的样品感染Hela细胞后表达的GM-CSF生物学活性；采用ELISA法，二次方程拟合处理试验数据，检测不同浓度梯度样品感染Hela细胞后的GM-CSF的表达量；采用ELISA法进行β半乳糖苷酶活性测定；采用肿瘤细胞（UACC 257）和正常细胞（GM 00038）进行溶瘤活性测定。结果： 测定了1批牛痘病毒粒细胞巨噬细胞集落刺激因子注射液，其病毒感染滴度为6.5×10⁸ PFU·mL^-1，病毒基因组滴度/感染滴度为27，各浓度梯度孔GM-CSF表达量均大于10 pg，GM-CSF生物学活性为181 rGCU，溶瘤活性为144 rOnU，β-半乳糖苷酶活性为124 rBU。结论： 对牛痘病毒GM-CSF注射液的生物学活性进行了相对全面的测定，各个项目均符合规定，能够用于该产品的质量控制，同时对同类产品的质量控制具有借鉴意义。