目的： 利用人诱导多能干细胞分化的心肌细胞（hiPSC-CMs）联合实时细胞分析（RTCA）技术，建立hiPSC-CMs体外心脏毒性评价模型，并选用阳性化合物进行验证。方法： 研究选用商业化来源的hiPSC-CMs，选用不同作用机制的心脏毒性药物：蒽环类抗癌药阿霉素（0.3、1、3 μmol·L^-1）、K⁺通道阻滞剂多非利特（0.03、0.1、0.3 μmol·L^-1）和E-4031（0.1、0.3、1 μmol·L^-1）、Na⁺通道阻滞剂美西律（3、10、30 μmol·L^-1）、多离子通道阻滞剂维拉帕米（0.1、0.3、1 μmol·L^-1）和苄普地尔（0.3、1、3 μmol·L^-1）、抗组胺药物特非那定（0.3、1、3 μmol·L^-1）和西沙必利（3、10、30 μmol·L^-1），分别给予hiPSC-CMs作用48 h，采用RTCA技术连续监测心肌细胞搏动的频率、振幅、细胞指数、搏动图谱等指标在给药前后的变化。结果： 阿霉素对心肌细胞的抑制作用呈现时效和量效依赖性特点；多非利特显著降低心肌细胞搏动幅度及频率；E-4031为1 μmol·L^-1时显著降低心肌细胞搏动频率，缩短振幅，而0.1、0.3 μmol·L^-1时则对心肌细胞无影响；30 μmol·L^-1美西律作用2 h内心肌细胞搏动频率相对空白对照组降低了66.4%，振幅缩短了60.7%，并导致心肌细胞搏动周期延长；苄普地尔浓度低于1 μmol·L^-1时对心肌细胞无影响，3 μmol·L^-1苄普地尔作用2 h导致心肌细胞搏动间歇性停搏，并伴随细胞活力轻微下降；维拉帕米作用2 h内各剂量组心肌细胞搏动频率分别增强了12.2%、13.1%、52.3%，而振幅分别降低了20.0%、61.7%、67.6%。0.3 μmol·L^-1以上浓度的维拉帕米导致心肌细胞搏动骤停（3/9）；特非那定浓度≥ 1 μmol·L^-1时短时间内即导致心肌细胞间歇性搏动骤停；西沙必利短期作用2 h内显著降低心肌细胞搏动频率和幅度，10 μmol·L^-1以上浓度的西沙必利持续抑制心肌细胞搏动频率。结论： hiPSC-CMs结合RTCA技术可用于预测药物的心脏毒性风险。