目的： 建立HPLC特征图谱，并建立HPLC法测定补肾助孕中10个成分的含量。方法： 采用Hedra ODS-2 C¹⁸色谱柱（250 mm×4.6 mm，5 μm），以乙腈（A）-0.2%磷酸水（B）为流动相，梯度洗脱，检测波长为237 nm，柱温30℃。以莫诺苷为参照峰，用中药色谱指纹图谱相似度评价软件（2004A版）对15批制剂进行相似度分析。结果： 15批制剂的图谱相似度均在0.98以上。没食子酸、5-羟甲基糠醛、莫诺苷、当药苷、马钱苷、芍药苷、金丝桃苷、紫云英苷、迷迭香酸、丹酚酸B质量浓度分别在13.50~540.00、40.02~1 600.84、15.92~636.80、5.02~200.80、15.59~623.60、26.32~1 052.84、15.96~638.42、12.00~480.07、9.12~364.81、21.92~876.80 μg·mL^-1范围内呈良好的线性关系，平均回收率分别在103.8%、96.8%、101.0%、95.3%、99.7%、99.0%、101.7%、96.5%、98.7%、103.1%；15批制剂中上述10个成分的含量范围分别为0.943~1.079、0.955~1.120、2.118~2.541、0.105~0.164、0.952~1.067、2.610~2.944、0.879~0.997、0.298~0.320、0.563~0.607、5.650~6.148 mg·g^-1。结论： 本研究建立了补肾助孕颗粒的特征图谱及多成分含量测定方法，为补肾助孕颗粒的质量控制及深入研究奠定了基础。