目的：利用转基因细胞法建立抗人表皮生长因子受体2（human epidermal growth factor receptor 2，HER2）单抗的抗体依赖细胞介导的细胞毒作用（antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity，ADCC）生物学活性检测方法。方法：利用Jurkat-hFcγRⅢa-NFAT转基因细胞系作为效应细胞，SKBR3细胞系作为靶细胞，通过荧光素酶检测系统（BioGlo^TM Luciferase Assay system）进行抗HER2单抗的ADCC生物学活性检测，同时对试验条件进行优化及方法学验证，并将该检测方法用于不同类型的抗HER2单抗ADCC效应的评价。结果：抗HER2单抗在该方法中存在量效关系，且符合四参数方程式：y=（A-D）/［1+（x/C）^B］+D，方法经优化后确定靶细胞为SKBR3细胞，抗体稀释起始工作质量浓度为4 000 ng·mL^-1，1∶4倍的稀释倍数，效靶比为15∶1，诱导时间为20 h。该方法具有良好的专属性；3次独立检测的板间、日间最大诱导倍数（fold of induction，FI）及半数有效浓度（concentration for 50% of maximal effect，EC₅₀）的RSD均小于10%；4个不同稀释组回收率样本经3次测定，相对效价分别为（46.27±2.01）%、（71.18±1.55）%、（133.17±9.91）%以及（166.55±15.73）%；对应的回收率分别为（92.53±4.01）%、（94.91±2.07）%、（106.54±7.93）%、（111.04±10.48），RSD均小于10%，且该方法也适用于不同变性程度及各类抗HER2单抗的ADCC效应评价。结论：本研究利用转基因细胞法成功建立抗HER2单抗ADCC生物学活性检测方法，该方法专属性强、重复性好，准确性高，可作为抗HER2单抗ADCC生物学活性的常规检测方法。