目的：探讨糖基化修饰对细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4抗体融合蛋白（CTLA4-Ig）融合蛋白稳定性的影响。方法：应用多种糖苷酶N-糖苷酶F（PNGase F）、内切糖苷酶F2（EndoF2）、唾液酸酶（neuraminidase）和O-糖苷酶（O-glycosidase）对样品进行处理。通过分子排阻色谱（SEC）测定不同酶切时间处理后样品纯度变化；应用差示扫描荧光（DSF）测定样品整体热力学参数的变化；应用差示扫描量热（DSC）测定样品各结构域热力学参数变化；在45℃条件下加热，分别于0、1、3、5、7、9、11和12周取样，通过SEC测定样品纯度的变化。结果：在N-糖苷酶F、内切糖苷酶F2和唾液酸酶分别处理过程中，CTLA4-Ig的聚体含量逐渐增加，而O-糖苷酶酶切过程中，聚体虽无明显变化，但碎片含量逐渐增加；经DSF测定，N-糖苷酶F和内切糖苷酶F2处理后解链温度（T_m）均明显下降，而唾液酸酶和O-糖苷酶处理后T_m无明显变化；经DSC测定，N-糖苷酶F和内切糖苷酶F2处理后T_m1下降，T_m2不变，T_m3上升，而唾液酸酶处理后T_m1和T_m3都略微有所上升，T_m2基本不变，O-糖苷酶处理后T_m值均变化；加速试验过程中，N-糖苷酶F和唾液酸酶处理样品的聚体上升，内切糖苷酶F2处理样品的的聚体不变；O-糖苷酶处理样品的的聚体不变，而碎片偏高。结论：通过多种分析手段研究发现，糖基化修饰与CTLA4-Ig的稳定性密切相关。