目的：建立二乙酰吗啡含量的¹H定量核磁共振（¹H qNMR）测定方法。方法：以对苯二甲酸二甲酯基准试剂为内标，以氘代氯仿为溶剂，采用Bruker Avance Ⅲ 600型核磁共振谱仪，noesyigld1d脉冲序列在恒温25℃下获取¹H NMR谱，测定二乙酰吗啡的含量，驰豫延迟时间为25 s。结果：以二乙酰吗啡的峰（δ 6.76）及对苯二甲酸二甲酯（δ 8.10）峰作为定量峰，测得精密度RSD（n=5）为0.22%，重复性RSD（n=5）为0.43%。¹H qNMR测得二乙酰吗啡的含量为98.7%，与质量平衡法结果98.7%（HPLC）、98.3%（GC）以及DSC法结果98.4%基本一致。结论：建立的¹H qNMR可测定二乙酰吗啡的含量。此方法准确快捷，简单易行，是对标准物质含量测定的一种良好的补充方法。