目的：建立超高效亲水色谱法快速测定吸烟者尿液中肌酐和尿酸的含量。方法：尿液样品采用自主设计的萃取瓶处理，然后以Waters ACQUITY UPLC BEH HILIC液相色谱柱（50 mm×2.1 mm，1.7μm）为固定相，70%乙腈（内含0.1%磷酸二氢氨）为流动相进行超高效液相色谱分离，流速0.5 mL·min^-1，检测波长235 nm，进样体积5.0μL，柱温30℃，紫外检测器检测。结果：选定实验条件下，尿酸质量浓度在2.5~500μg·mL^-1、肌酐质量浓度在5~1 000μg·mL^-1内均具有良好的线性关系（r>0.999 5）；尿酸和肌酐的检测下限分别为0.25μg·mL^-1与0.22μg·mL^-1。在3个不同添加水平下，方法平均回收率在95.6%~102.3%，日内精密度和日间精密度均小于3.4%，具有较好的回收率和重复性。结论：本文所建立的方法能够满足快速、准确地测定吸烟者尿液中尿酸和肌酐的要求。