目的：建立细胞培养-核酸扩增荧光定量PCR（integrated cell culture quantitative PCR，ICC-qPCR）病毒灭活验证方法；结合传统细胞病变效应（cytopathic effect，CPE）法，考察ICC-qPCR方法的适用性；利用这2种方法验证复用电生理导管环氧乙烷病毒灭活工艺的有效性。方法：通过制备指示病毒（伪狂犬病毒，PRV）质粒DNA作为定量标准品，用PRV特异性引物建立定量PCR方法；再用PRV病毒侵染宿主细胞，同时用热灭活PRV作为对照，确定PRV活病毒全部进入宿主细胞但不扩增的最佳样本收获时间，通过检测细胞中活病毒，建立ICC-qPCR活病毒检测方法；确立CPE法测定滴度与ICC-qPCR法检测DNA拷贝数之间的线性关系。最后，模拟临床使用的最坏情况对一次性电生理导管进行含指示病毒（PRV）生物污染物负载，模拟环氧乙烷病毒灭活工艺，通过ICC-qPCR和CPE法验证病毒灭活工艺的有效性。结果：本研究中建立的ICC-qPCR方法的标准曲线线性关系r²>0.99；定量下限为10⁴ copies&#183;μL^-1，约相当于2 logs&#183;mL^-1，检测下限为10³ copies&#183;μL^-1，约相当于-1 logs&#183;mL^-1；特异性结果表明只能检测到PRV的扩增曲线，无非特异性扩增；重复性试验的RSD<5%。确定ICC-qPCR方法中PRV最佳收获时间为宿主细胞染毒后1~2 h。ICC-qPCR检测拷贝数与病毒滴度间具有良好的线性关系（r²>0.99）。ICC-qPCR法病毒灭活工艺验证结果表明：经环氧乙烷灭活后病毒负载导管其病毒滴度降低>9.0 logs；阴性对照组（负载不含PRV生物污染物）和空白导管样品均未检出病毒DNA。CPE法的病毒滴定结果表明，经环氧乙烷灭活后病毒负载导管其病毒滴度降低≥ 8.5 logs&#183;mL^-1；阴性对照组和空白导管样品均未检出PRV。结论：本研究建立的ICC-qPCR方法应用于PRV病毒灭活验证，可以有效检测活病毒，比传统CPE法（-0.5 logs&#183;mL^-1）灵敏度高。将此方法应用于复用电生理导管的环氧乙烷病毒灭活工艺验证，同时与CPE法进行比较，验证了ICC-qPCR方法的适用性以及环氧乙烷灭活电生理导管负载的PRV病毒的工艺有效性。