目的：建立层色谱-表面增强拉曼光谱（TLC-SERS）方法现场快速筛查标示降糖作用的中成药与保健食品中非法掺杂的化学物质，并验证其可靠性。方法：待测样品TLC分离、在斑点表面增强后，采集拉曼光谱信息，利用药品快检支撑系统，与对照品增强后拉曼光谱库信息进行相似度评价、特征峰匹配，筛查斑点表面增强拉曼光谱与对照品增强后拉曼光谱库的相似顺序，相似度高于80%的拟定为疑似阳性样品，采用HPLC-MS离子谱和/或一级、二级质谱库进行比对确证。结果：12种常见添加降糖化学物质，4种使用水胶（AgNO₃+柠檬酸钠）、8种采用DMF胶（有机胶，AgNO₃+PVP），表面增强拉曼光谱信号满意，可以作为标准入库。TLC-SERS筛查发现，2种模拟中成药、4种模拟保健食品中疑似添加了降糖化学物质，经HPLC-MS保留时间、母离子与碎片离子质荷比对比确证，筛查结果与确证结果一致。结论：本方法适用于现场快速高通量筛查中成药、保健食品中非法掺杂的化学物质，TLC-SERS方法可靠。