目的：建立高效液相色谱-荧光检测方法测定天麻中天麻素、对羟基苯甲醇、巴利森苷A、巴利森苷B、巴利森苷C的含量。方法：采用资生堂MG Ⅲ色谱柱（4.6 mm×250 mm，5 μm），流动相为0.1%甲酸水（A）-乙腈（B），流速为1 mL·min^-1，柱温35℃，进样量5 μL，荧光检测器，激发波长为228 nm，发射波长为300 nm。结果：天麻素、对羟基苯甲醇、巴利森苷A、巴利森苷B、巴利森苷C的线性范围分别在10~5000（r=0.999 6）、10~5 000（r=0.999 9）、250~50 000（r=0.999 6）、250~50 000（r=0.999 9）、250~50 000 ng·mL^-1（r=0.999 7）范围内线性关系良好，平均回收率（n=6）分别为98.5%、97.2%、99.2%、98.7%、96.8%，RSD分别为5.8%、4.6%、0.86%、2.4%、4.8%；28批样品中上述5个成分的含量分别为0.5~20.0、0.1~2.5、0.5~15.4、1.6~8.2、0.7~2.1 mg·g^-1。结论：建立的方法杂质干扰少，分离度好，灵敏度高，线性范围宽，适于天麻成分分析及药材质量控制。