目的：建立三叶木通药材中皂苷PH、皂苷PJ1的TLC鉴别和皂苷PH、akemisaponin E、皂苷PJ1和scheffoleoside A的HPLC含量测定方法。方法：TLC法，展开剂为三氯甲烷-甲醇-甲酸（20：10：1），显色剂为10%硫酸乙醇溶液；HPLC法，采用依利特C₁₈色谱柱（250 mm×4.6 mm，5 μm），以乙腈-水（21：79）为流动相，流速1.0 mL·min^-1，检测波长200 nm，柱温30℃。结果：三叶木通药材中皂苷PH、皂苷PJ1的TLC分离效果均较好；HPLC法测得皂苷PH、akemisaponin E、皂苷PJ1和scheffoleoside A的进样量分别在0.201~5.025 μg（r=0.999 9）、0.076~1.888 μg（r=0.999 9）、0.224~5.608 μg（r=1.000 0）和0.041~1.035 μg（r=0.999 9）范围内与峰面积呈现良好的线性关系；平均回收率（n=3）分别为99.8%、98.2%、99.5%、98.9%，RSD分别为0.46%、1.2%、0.40%和1.0%；5批样品中皂苷PH、akemisaponin E、皂苷PJ1和scheffoleoside A的含量范围分别为2.094~3.928、0.956~1.418、2.958~4.472和0.526~0.797 mg·g^-1。结论：此方法简便易行，重复性好，可作为三叶木通药材质量控制指标。