目的：通过建立QuEChERS（快速、简易、廉价、有效、稳定、安全）前处理方法，结合液相色谱-三重四极杆质谱联用技术，实现肝细胞癌血液中3种小分子代谢物的同时检测。方法：血清样品经乙腈提取，无水硫酸镁盐析及N-丙基乙二胺（PSA）吸附剂净化后，取上清液采用Phenomenex Luna Omega 3 μm PS C₁₈ 100&#197;（150 mm&#215;2.1 mm）色谱柱，以甲醇-0.1%乙酸水溶液为流动相，梯度洗脱。电喷雾离子源正离子扫描，多反应监测模式（MRM）进行定量分析。结果：十四酰胺的检测下限为0.6 ng&#183;g^-1，定量下限为2 ng&#183;g^-1；油酸酰胺的检测下限为0.3 ng&#183;g^-1，定量下限为1 ng&#183;g^-1。3种小分子代谢物质量浓度在10~100 ng&#183;mL^-1范围内呈线性，其中目标物线性相关系数（R²）均大于0.991 7，基质效应（ME）在0.79~1.55之间；3个水平加样回收率在77.5%~105.1%之间，日内精密度（n=5）在6.9%~11.8%之间，日间精密度在7.4%~11.1%之间；利用该方法扩大样本量检测，3种小分子代谢物在健康组血清中的浓度（2.591、0.221、7.485 mg&#183;kg^-1）和肝癌组血清中的浓度（9.599、0.266、5.063 mg&#183;kg^-1）差异显著（P<0.01）。结论：该方法简单快捷，准确可靠，适合于大批量肝细胞癌血液样品中3种小分子代谢物的快速检测。