目的：考察体外重组三维（3D）表皮模型（Epikutis?）作为标准物质及用于替代模型皮肤刺激性检测方法的可行性。方法：利用由人源性角质形成细胞构建的体外重组3D表皮模型（Epikutis?）作为标准物质的原料，参照经济合作与发展组织439文件（OECD 439）：替代模型皮肤刺激性检测方法，选择组织活力和屏障功能指标，考察表皮模型的均匀性和稳定性，并通过多实验协作测定对其组织活力和屏障指数进行分析。其中，组织活力测定采用MTT试验，以阴性对照光密度值作为组织活力指标；屏障功能测定采用1% TritonX-100作用不同时间后，测定半数活性时间，作为屏障指数（ET₅₀）。结果：Epikutis?表皮模型（每批100多个）的均匀性良好，其样品间均匀性不确定度为：u_bb=0.013。短期稳定性（模拟保存运输条件下，运输箱内温度4~25℃放置24 h），组织活力（光密度，OD）为1.029，其短期稳定性不确定度为：u_s=0.018；ET₅₀的平均值为（2.08±0.12）h，其短期稳定性不确定度u_s=0.159，无明显活性及屏障功能降低趋势。协作测定结果：OD为1.033。其检测不确定度为：u_char=0.036；最终的合成不确定度（含u_bb、u_s和u_char）为0.043。ET₅₀的协作标定结果为1.70 h；最终的合成不确定度为0.159。选择10种OECD 439提供的参考物质种类，进行皮肤刺激性试验，其结果与OECD439发布的刺激性判定结果一致，符合预期结果。结论：Epikutis?表皮模型的组织活力：1.033±0.086，最终定值范围为：0.9≤OD≤1.2；ED₅₀：（1.70±0.32）h，最终定值范围为：1.4 h≤ET₅₀≤2.0 h。上述研究结果表明Epikutis?表皮皮肤模型满足OECD TG 439所推荐的替代模型皮肤刺激性检测方法的使用，可以用于化妆品、化学试剂、医疗器械等皮肤刺激性定性检测，也为纳米材料的透皮吸收及皮肤毒性研究提供了替代方法模型。