目的：建立酰胺基亲水作用色谱-高效液相色谱-紫外法测定DHA颗粒中磷脂酰丝氨酸的含量。方法：以正己烷-异丙醇为提取溶剂对样品进行超声提取；选用Waters XBridge Amide（4.6 mm×250 mm，3.5 μm）色谱柱，以乙腈-异丙醇（7∶3）为流动相，流速1.0 mL·min^-1，柱温45℃，进样量20 μL，紫外检测波长203 nm，单次运行时间10 min。结果：样品中磷脂酰丝氨酸获得很好的分离，在0.1~1.0mg·mL^-1线性关系良好（r=0.999 9）；在高、低浓度的回收率（n=6）分别为101.2%和95.8%，RSD分别为1.3%和2.6%；3批样品中磷脂酰丝氨酸含量分别为10.5、10.3、10.6 mg·g^-1。结论：本方法操作简捷、环保、高效，经方法学验证，本法专属性、重复性好，准确度高，适应性强，为含磷脂酰丝氨酸功能食品的全面质量控制提供一种新的方法。