目的：建立同时测定马来酸噻吗洛尔滴眼液中噻吗洛尔和羟苯乙酯含量的HPLC法。方法：采用C₁₈色谱柱（4.6 mm×150 mm，5 μm），以乙腈（B）-0.1%磷酸溶液（A）（1 000 mL，加三乙胺1 mL，用氢氧化钠试液调节pH至3.9）为流动相，梯度洗脱（0~5 min，78% A；5~5.2 min，78% A→55% A；5.2~10 min，55% A；10~11 min，55% A→78% A；11~13 min，78% A），流速1.0 mL·min^-1，检测波长275 nm，柱温35℃，进样量20 μL。结果：噻吗洛尔和羟苯乙酯质量浓度分别在6.07~505.99 μg·mL^-1（r=1.000）和0.37~30.68 μg·mL^-1（r=0.999 9）范围内呈良好的线性关系，平均回收率（n=9）分别为99.8%（RSD=0.8%）和99.8%（RSD=0.9%）。7批样品中噻吗洛尔的含量分别为102.7%、100.4%、99.8%、100.4%、104.1%、98.9%和94.2%，羟苯乙酯的含量分别为0.283、0.286、0.291、0.291、0.434、0.137和0.270 mg·mL^-1。结论：该方法经方法学验证，可用于马来酸噻吗洛尔滴眼液的质量控制。