目的：建立鸡骨草UPLC指纹图谱测定方法，对不同产地鸡骨草的质量进行较全面的评价。方法：采用ACQUITY UPLC HSS T3（100 mm×2.1 mm，1.8 μm）色谱柱，以乙腈-0.1%甲酸水溶液为流动相进行梯度洗脱，检测波长254 nm，柱温35℃，流速0.3 mL·min^-1。采用相似度评价、聚类分析、主成分分析3种方法对16批鸡骨草药材指纹图谱进行研究。结果：建立了鸡骨草药材的UPLC指纹图谱，确定了52个共有峰；通过相似度评价、聚类分析和主成分分析结果可知16批鸡骨草药材质量有差异，不同产地间和同一产地内药材均有一定差异，栽培品质量与野生品种之间有明显差异。结论：该方法为鸡骨草药材的质量控制提供了较为全面、有效的快速评价方法。