目的：采用高效液相色谱-质谱联用技术鉴定艾滋病治疗药物去羟肌苷的有关物质结构。方法：InertSurstain C₁₈（250 mm×4.6 mm，5 μm）色谱柱，以0.386%醋酸铵溶液加氨水调节pH至8.0为流动相A，以甲醇-乙腈（50∶50）为流动相B，进行梯度洗脱，电喷雾正离子化高分辨TOF/MS和MS/MS检测并解析有关物质结构。TOF/MS雾化气压力345 kPa，温度350℃，干燥气流量10 L·min^-1，毛细管电压4 kV，碎片电压100 V，MS/MS测定氩气CID压力0.2 Pa，碰撞能量25 eV。结果：检测到去羟肌苷原料中共有8个有关物质，通过有机反应机制分析和质谱解析鉴定了他们的结构，他们分别是9-（2-氧基-丁酸）-1，4，5，7，8，9-六氢-嘌呤-6-酮、次黄嘌呤、肌苷、2'-去氧肌苷、9-（2-羟基-乙酰基）-1，9-双氢-嘌呤-6-酮、3'-去氧肌苷、2'，3'-脱水肌苷、9-（2-羟乙基-4-丙酸甲酯-四氢呋喃）-1，9-双氢-6H-嘌呤-6-酮。结论：采用色谱-质谱联用技术能有效地鉴定去羟肌苷的有关物质，可为其质量控制研究提供参考。