目的: 利用传统四大鉴定、DNA条形码分子鉴定以及染色体倍性鉴定不同来源的五叶型半夏种质资源。方法: 利用组织培养对收集的13份资源进行组培扩繁,按照《中华人民共和国药典》 （2020年版,一部）对13份资源的基原、性状、显微特征进行鉴定;以三氯甲烷 ∶ 甲醇=6 ∶ 1为展开剂,10%硫酸乙醇为显色剂,对13份资源进行薄层鉴定;利用PCR扩增不同资源的ITS2核酸序列,用Snapgene和Mega软件进行剪切比对,并构建系统发育树;利用染色体计数法对五叶型半夏的倍性进行鉴定。结果: 五叶型半夏资源均与《中国植物志》中半夏描述相符,初步鉴定为半夏资源;五叶型半夏资源性状、显微特征与《中华人民共和国药典》 （2020年版,一部）半夏描述一致,薄层鉴定结果显示传统半夏与五叶型半夏斑点一致,且可以很好与虎掌区分开来。ITS2的扩增、测序成功率均为100%,基于NCBI数据库内天南星科半夏属资源ITS2序列构建的NJ系统发育树,五叶型半夏与半夏属资源亲缘关系更近,且与传统半夏资源聚为一类。染色体计数结果表明来自云南的3份种质资源SY-3、WY-8和WY-9为六倍体（2n=6x=78）;来自湖北9份种质资源（SY-1、SY-2、WY-1、WY-2、WY-3、WY-4、WY-5、WY-6和WY-7）为八倍体（2n=8x=104）;1份虎掌资源为二倍体（2n=2x=26）。结论: 五叶型半夏为半夏属半夏资源,明确半夏五叶突变体的倍性水平,为其新种质培育提供重要依据。

目的: 建立肉桂叶的HPLC指纹图谱,并结合化学计量学和一测多评法评价不同批次肉桂叶的质量。方法: 采用HPLC法建立了12批肉桂叶的指纹图谱并进行相似度评价,采用聚类分析（CA）和主成分分析（PCA）,对不同批次肉桂叶进行化学模式识别分析。以肉桂酸为内标参照物,建立一测多评（QAMS）法,计算2-羟基肉桂醛、肉桂醇、桂皮醛、邻甲氧基肉桂醛的相对校正因子,采用外标（ESM）法和QASM法测定肉桂叶中2-羟基肉桂醛、肉桂醇、肉桂酸、桂皮醛、邻甲氧基肉桂醛的含量。结果: 指纹图谱共确定 12 个共有峰,通过对照品指认了7个化学成分,除S3与S11批次外,其余批次肉桂叶样品与对照指纹图谱的相似度均>0.9;CA将12批肉桂叶分为2类;PCA显示不同批次间肉桂叶的化学成分存在一定的差异,并确定了3个主成分,累计方差贡献率为 86.022%;QAMS与ESM测定的以上5个化合物含量值无明显差异。结论: 建立的肉桂叶指纹图谱及含量测定方法稳定、可靠,可为肉桂叶的质量控制及评价提供参考。

目的: 对尼莫地平注射用浓溶液进行配伍稳定性研究及比格犬体内药代动力学研究。方法: 采用Hyper Star BDS C18色谱柱（150 mm×4.6 mm,5 μm）;以水-四氢呋喃-乙腈为流动相;检测波长为235 nm;进样量10 μL;流速1.0 ml · min-1;柱温30 ℃;运行时间30 min;采用HALO 90A AQ-C18色谱柱（3.0×30 mm,2µm）;以95%水/5%乙腈（0.1%甲酸）为流动相A,95%乙腈/5%水（0.1%甲酸）为流动相B,梯度洗脱;流速0.6 mL · min-1;自动进样器温度：4 ℃;运行时间：2.30 min,进样量：8.00 mL。质谱条件采用电喷雾离子源,正离子模式,气帘气为35 psi,碰撞气为10 psi,喷雾电压为4500 V,雾化温度为500 ℃,雾化器、辅助气均为50 psi,尼莫地平m/z为417.18→122.20,地塞米松m/z为437.10→361.00。采用HPLC法测定尼莫地平注射用浓溶液及尼膜同®与不同溶液配伍后的含量;采用HPLC-MS/MS法测定2个制剂在Beagle犬体内血药浓度,使用WinNonlin 8.3.4软件计算药动学参数,SPSS Statistics 26软件对主要药动学参数进行统计分析。结果: 尼莫地平注射用浓溶液与不同溶液配伍相容性良好,配伍后含量在48 h内无明显变化,而原研制剂配伍后含量显著下降,并肉眼可见晶体析出;尼莫地平注射用浓溶液与原研制剂的Cmax、Tmax及AUC均无统计学差异（P>0.05）。结论: 尼莫地平注射用浓溶液稳定性好,且未改变API的药代动力学特征,具有良好的临床应用前景。

目的: 基于前期胆南星菌种分离及炮制原理研究,对优势菌种进行筛选并进一步优化混合菌种发酵胆南星的炮制工艺,为胆南星混合菌种发酵新工艺提供实验依据。方法: 将前期分离的菌种分别进行单菌种发酵制备胆南星,采用HPLC-ELSD法测定不同菌种制得的胆南星中猪胆酸、猪去氧胆酸、鹅去氧胆酸含量,筛选出胆南星发酵优势菌种。以游离型胆酸总量、牛磺酸、甘氨酸和胆红素为指标,以混合菌种的加入量、发酵温度、发酵时间为考察因素,采用正交试验联合多指标加权评分法对混合菌种发酵工艺进行考察,确定胆南星混合菌种发酵新工艺。结果: 筛选出铅黄肠球菌和肠球菌（厌氧）为优势菌种;混合菌种发酵炮制的新工艺为：在天南星细粉中加入含有10%~15%混合菌液[铅黄肠球菌液和肠球菌（厌氧）液1 ∶ 1混合]的猪胆汁1 ∶ 1混匀,置于32 ℃、80%湿度的恒温恒湿箱中发酵培养15 d,取出,蒸1 h至透,切块,晒干。结论: 优选出的胆南星混合菌种发酵工艺稳定可行,可提高胆南星产品质量及其稳定性,为后续发酵制胆南星的规范化生产提供科学依据。

目的: 为识别制药环境中的污染微生物,并评估其对药品质量的影响,建立应对策略,提供信息参考。方法: 对《伯杰氏系统细菌学手册》、权威文献、监督机构文件的收集、汇总、分析、提取,总结制药行业的微生物特性和风险信息注释模式,并通过对微生物关键特性信息的结构化,将其存储于基于MySQL的知识库管理系统。利用Vue+node.js进行前端设计、ECharts进行数据可视化,构建了便捷、可统计的综合性知识库。结果: 获得包含20 678个微生物物种特性及风险信息的查询云平台——DM-Mpedia（http：//dmcloud.dmicrobe.cn/#/preview）。结论: DM-Mpedia的建立有助于微生物工作者对污染微生物及不可接受微生物进行更好的评估和控制。

目的: 考察“浙八味”中药饮片微生物污染情况及群落特征,为中药饮片微生物限度标准的修订提供依据。方法: 参照2020年版《中华人民共和国药典》,对40批样品的需氧菌总数（TAMC）、霉菌和酵母菌总数（TYMC）、耐热菌总数及控制菌进行检查,并基于16S rDNA高通量测序技术探究“浙八味”中药饮片污染微生物的群落特征。结果: 40批样品lgTAMC介于0.50~7.87,lgTYMC介于0.50~6.72,耐热菌和耐胆盐革兰阴性菌（BTGB）的检出率分别为72.5%和75%,且有3批次样品BTGB超过104 cfu · g-1;所有样品均未检出大肠埃希菌和沙门菌,但鉴定出阪崎克罗诺杆菌、肺炎克雷伯氏菌、产气肠杆菌等重要的条件致病菌。16S rDNA高通量测序结果表明,“浙八味”中药饮片污染微生物分布于25个门、538个属,不同品种中药饮片中优势菌属具有显著差异,并且检出不动杆菌属、沙雷氏菌属、黄杆菌属和埃希氏-志贺菌属等常见的致病菌或条件致病菌所在菌属。结论: 16S rDNA高通量测序能够获得更加全面的污染微生物群落信息,不同品种中药饮片微生物污染程度及群落特征均具有明显差异。多种致病菌的检出提示饮片生产及经营企业应注意微生物污染的风险防控,同时建议相关部门根据饮片的分类完善微生物限度评价标准。

目的: 使用不同种牛、猪源病毒感染人间充质干细胞（HMSC）,并通过对比牛、猪源病毒感染人源细胞系293T/17和MRC-5后的感染和扩增情况,综合分析HMSC对常见猪、牛源病毒的易感性。方法: 将HMSC、人胚肺成纤维细胞（MRC-5）、人胚肾细胞（293T/17细胞）、非洲绿猴肾细胞（Vero细胞）以及猪肾细胞（PK-15细胞）分别按照7×103个 · cm-1接种24孔板和25 cm2培养瓶,分别以感染复数（MOI）为0.02接种猪细小病毒（PPV）;将HMSC、MRC-5、293T/17细胞、Vero细胞以及牛鼻甲骨（BT）细胞分别按照7×103个 · cm-1接种24孔板和25 cm2培养瓶,分别以MOI为0.02接种牛细小病毒（BPV）、牛腹泻病毒（BVDV）、牛副流感病毒3型（PI3病毒）、牛腺病毒3型（BAV-3）以及呼肠孤病毒（REO-3）,其中24孔板细胞培养7 d,25 cm2培养瓶细胞盲传3代,第3代盲传至24孔板,各代次分别进行细胞病变观察、免疫荧光检测和病毒核酸qPCR检测。结果: 与PPV敏感细胞PK-15相比,接种PPV后的Vero、HMSC和MRC-5各代均未观察到细胞病变和荧光,PPV拷贝数随着传代次数持续下降,而293T/17细胞虽未观察到细胞病变,但在盲传3代后观察到绿色荧光,且PPV拷贝数持续维持在较高水平,为1.49× 107 copies · mL-1。与牛源病毒敏感细胞BT细胞相比HMSC对PI3、REO-3、BPV这3种牛源检测相关病毒也呈现出易感性,感染后均能产生不同程度的细胞病变和免疫荧光阳性,通过qPCR法均能检测到对应病毒核酸,其中PI3、REO-3可以在HMSC中扩增,但扩增水平低于293T/17。结论: HMSC和MRC-5相似,对BPV、REO-3和PI3病毒易感染,对PPV、BVDV和BAV-3病毒不易感染;293T/17细胞对PPV、REO-3和PI3病毒易感,对BPV、BVDV和BAV-3病毒不易感染。在HMSC的病毒安全风险控制中,如引入猪源或牛源动物源性材料,应更加关注BPV、REO-3和PI3病毒的感染风险。

真菌类中药作为中医药产业的重要组成部分,在临床应用中日益增多。本文统计了我国颁布的真菌类中药质量标准共计442项,其中《中华人民共和国药典》标准19项,地方标准398项,其他法定标准包括局颁标准、部颁标准25项;共涉及真菌中药品种67种,涉及真菌物种66种。本文在分析现有质量标准的基础上,从真菌类中药质量控制的角度,系统论述了真菌类中药的性状、显微特征、DNA鉴别、理化鉴别、含量测定（多糖、核苷、甾醇、萜类、蛋白/肽、酯类、糖醇等）、有害物质等质量特征及相关技术;并对真菌类中药质量标准未来的发展提出了建议,为真菌类中药的质量评价提升及质量保障提供参考。

多角度静态光散射技术是生物大分子领域重要的表征手段之一,能够获得生物大分子丰富的结构信息,如分子量、分子量分布、均方根旋转半径、第二维里系数、分子链构象等,但该技术原理较为复杂,表征的准确性受多种因素影响。本文介绍了生物大分子稀溶液中多角度静态光散射的基本原理,针对该技术准确表征的影响因素,从dn/dc、第二维里系数（A2）、延迟体积、外推形式、荧光干扰等方面进行文献综述和经验总结。本文可以帮助分析工作者更好地理解并掌握这一技术,以获得准确的表征数据。

目的: 建立青白通痹胶囊的指纹图谱,结合化学计量学和网络药理学方法,分析预测青白通痹胶囊潜在的质量标志物（Q-Marker）,并对Q-Marker成分进行含量测定,为其质量控制提供参考。方法: 采用Agilent 5 TC-C18（250 mm×4.6 mm,5 μm）色谱柱,以乙腈（A）-0.1%磷酸水溶液（B）为流动相,梯度洗脱,流速1.0 mL · min-1,柱温30 ℃,进样体积10 µL,紫外检测波长210 nm（0~45 min）、260 nm（45~70 min）,建立指纹图谱并确定共有峰,通过与对照品相对保留时间及紫外光谱的比对进行色谱峰对应化合物的指认,经单煎液对各共有峰进行归属。采用化学计量法对10批青白通痹胶囊进行质量评价,借助正交偏最小二乘-判别分析（OPLS-DA）分析筛选青白通痹胶囊的主要差异性标志物;结合网络药理学,通过相应数据库筛选差异性标志物的核心靶点和关键通路,构建“成分-靶点-通路”网络图,结合上述结果筛选可用于预测青白通痹胶囊的Q-Marker,并建立对预测得到的标志性成分进行含量测定的HPLC方法。结果: 建立了青白通痹胶囊的HPLC指纹图谱,标记24个共有峰,对其进行峰归属,其中1~3、5~8、10~11、13、16号峰来自青风藤,4、9、12、14、16、18~19号峰来自白芍,15、17、20~24号峰来自炙甘草,并指认了其中的8个共有峰,分别为儿茶素、青藤碱、没食子酸、木兰花碱、芍药苷、甘草苷、1,2,3,4,6-O-五没食子酰葡萄糖、甘草酸。相似度评价显示,10批青白通痹胶囊样品的相似度为0.934~1.000。主成分分析（PCA）显示前4个主成分的累积方差贡献率为93.998%,OPLS-DA显示有8个成分变量重要性投影（VIP）值较大。采用网络药理学的方法分析得出儿茶素、青藤碱等活性成分可能通过37个核心靶点、10条主要通路发挥药效作用,初步筛选儿茶素、青藤碱、没食子酸、木兰花碱、芍药苷、甘草苷、1,2,3,4,6-O-五没食子酰葡萄糖、甘草酸为青白通痹胶囊潜在的Q-Marker。同时测定这8个成分的含量,方法学考察结果良好,平均加样回收率为96.81%~103.44%,RSD为0.6%~3.7%。10批样品中儿茶素、青藤碱、没食子酸、木兰花碱、芍药苷、甘草苷、1,2,3,4,6-O-五没食子酰葡萄糖、甘草酸的质量分数分别为0.907 1~1.189 3、2.183 3~3.118 6、 0.397 0~1.427 6、3.507 9~5.446 6、14.207 7~19.570 1、1.412 8~3.577 5、0.442 0~1.697 7、2.738 8~4.761 2 mg · g-1。结论: 本研究建立的青白通痹胶囊指纹图谱方法简单,重复性好,筛选的指标性成分将为青白通痹胶囊的质量控制提供依据。

目的: 建立基于Nb2-11细胞增殖的聚乙二醇化重组人生长激素（PEG-rhGH）体外生物学活性测定标准化方法,研究Nb2-11细胞法替代体内动物法的可行性。方法: 利用Nb2-11细胞法检测9批PEG-rhGH注射液体外生物学活性,拟订实验有效标准。按照2020年版《中华人民共和国药典》通则9401进行方法学验证。4家实验室协作研究检测2批PEG-rhGH原液与9批注射液的生物学活性,研究方法的精密度。利用Nb2-11细胞法和体内动物法分别检测8批PEG-rhGH原液和9批PEG-rhGH注射液的生物学活性,研究体内外方法测定结果的一致性。检测24批不同效期PEG-rhGH注射液的体外生物学活性,研究PEG-rhGH注射液体外生物学活性的标准限度。结果: 本方法相对准确度的相对偏倚范围在-3.059%~3.557%,线性回归方程的斜率为0.984,中间精密度几何变异系数范围为5.667%~6.923%,拟订实验有效标准通过率为100%,实验室间几何变异系数为2.281%,体内外检测结果的平均比率为0.938,不同效期PEG-rhGH产品的相对效价在100%~119%。结论: 本方法具有良好的实验室内及实验室间重现性,与体内动物法检测结果具有良好的一致性。本方法可作为测定PEG-rhGH产品生物学活性的标准化方法替代体内动物法应用于PEG-rhGH的质量控制和放行检验。

目的: 建立一种磁性固相萃取-超高效液相色谱-串联质谱（MSPE-UHPLC-MS/MS）快速检测污水中14个芬太尼类毒品的方法。方法: 污水样品经新型混合模式弱阳离子交换磁性固相萃取材料Fe3O4@poly（ST/DVB/MA-COOH）净化和浓缩后,采用Waters Acquity UPLC HSS T3（150 mm×2.1 mm,1.8 μm）色谱柱进行分离,以0.1%甲酸-水溶液（A）和0.1%甲酸-乙腈溶液（B）为流动相,梯度洗脱,柱温40 ℃,流速0.3 mL · min-1,进样量2.5 µL,随后进入质谱电喷雾离子源,在多反应检测模式下进行检测。结果: 14个芬太尼类毒品质量浓度在0.04~4 ng · L-1范围内线性关系良好（r≥0.998 4）,检出限（LOD）为0.013 ng · L-1,定量限（LOQ）为0.04 ng · L-1。14个分析物在低、中、高3种加标浓度下方法的回收率为85.4%~114.7%,日内精密度（n=6）为2.0%~6.4%,日间精密度（n=3）为0.4%~2.4%。在5份实际污水样品中检测出芬太尼,浓度范围为0.21~0.46 ng · L-1。结论: 本方法具有前处理时间短,操作简单,溶剂用量少,灵敏度高和重现性好等优点,适用于污水样品中芬太尼类毒品的高通量筛查和定量分析。

目的: 对合成大麻素类新精神活性物质在电子轰击模式下质谱(EI-MS)的裂解规律进行探讨。方法: 采用气相色谱-质谱(GC-MS)对40种合成大麻素类进行系统研究,电子轰击电离源,电子能量70 eV;扫描范围m/z 50~600。结果: 依据“头部基团”和“连接基团”结构的不同,将40种合成大麻素分为6类,分别为苯基异丙基-酰胺类、金刚烷-酰胺类、氨甲酰基/丁酸甲酯-酰胺类、萘甲酰类、苯甲/乙酰类和四甲基环丙烷-酰类。通过对合成大麻素EI-MS质谱图的解析,给出了不同种类合成大麻素的EI-MS裂解规律以及特征离子。合成大麻素主要的EI-MS裂解规律为“连接基团”中羰基的两侧极易发生α断裂,以及吲哚/吲唑母核上的N原子易发生γ-H重排,并失去一分子R₁。此外,碎片离子m/z 116、130、144为吲唑母核的特征碎片,而碎片离子m/z 117、131、145为吲哚母核的特征碎片离子,可用于确定合成大麻素母核。结论: 该类化合物有着较强的裂解规律,在缺少标准物质或商业化的质谱库难以获取时,所提出的合成大麻素EI-MS裂解规律可以帮助对未知的合成大麻素进行快速结构鉴定。

目的: 分析不同采收期辛夷挥发油的组分和相对含量,探讨5个采收期辛夷化学成分的动态变化规律,并评价其抗氧化、抗菌活性。方法: 采用水蒸气蒸馏法对5个采收期辛夷药材进行挥发油提取,利用气相色谱-质谱联用技术分析其化学成分,并计算各成分的相对含量;对5个采收期辛夷的成分进行偏最小二乘法判别分析,筛选出差异性化合物;采用铁离子还原/抗氧化能力法测定辛夷挥发油的抗氧化活性,96孔板法研究其体外抗菌活性。结果: 第4采收期(2023年2月10日)辛夷药材总挥发油平均含量最高;从辛夷挥发油中鉴定出38个成分,筛选得到12个差异性化合物,包括γ-衣兰油烯、榄香烯、δ-杜松烯、α-松油醇等,其中γ-衣兰油烯、别香橙烯、2-茨醇、樟脑和顺式-4-侧柏醇在第4采收期相对含量最大,与挥发油含量变化趋势基本一致;5个采收期辛夷挥发油均表现出一定的抗氧化、抗菌活性,第4采收期抗氧化能力最强,且对五种菌的抑制作用均较强。结论: 5个采收期辛夷挥发油化学成分基本相同,但在各采收阶段其挥发性成分相对含量有明显差异,推测2月初为辛夷最佳采收期。

目的: 研究淫羊藿醇提物的香味成分以及对淫羊藿醇提物进行热裂解产物分析。方法: 采用电子鼻对淫羊藿醇提物挥发性成分进行分析;通过正交试验优化淫羊藿醇提工艺;采用热重-气质联用分析仪(TG-GC-MS),模拟卷烟燃烧过程,分析淫羊藿醇提物浸膏在氮气环境中的裂解产物,并对其裂解机制进行推测。结果: 各浓度乙醇提取的淫羊藿醇提物共检测出22个挥发性成分,60%浓度的乙醇提取的淫羊藿优于其他浓度;淫羊藿浸膏裂解产物在150、300、450 ℃共鉴定出78个化合物,包括醛、酮、醇、酚、呋喃类化合物及芳香族化合物等香气成分。结论: 淫羊藿醇提物本身含有许多香味挥发性成分,在热裂解后产生大量酮、醇、酚、呋喃类等挥发性香气化合物。

目的: 建立液液萃取液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)同时测定人血浆中甘草酸、甘草次酸的浓度。方法: 在0.1 mL人空白血浆中加入甘草酸、甘草次酸及内标物Apixaban-13C-d₃(IS),离子化试剂(20%甲酸溶液)50 μL,以乙酸乙酯490 μL、甲基叔丁基醚210 μL为萃取剂,萃取后上清液氮气吹干,再用含0.2%甲酸的[乙腈-水(1∶1)]溶液200 μL复溶,进行LC-MS/MS分析。色谱条件:采用Boston Mni C₁₈(50 mm×2.1 mm,3 μm)色谱柱,流动相为0.2%甲酸水溶液-0.2%甲酸乙腈溶液,梯度洗脱,流速0.6 mL·min^-1,柱温40 ℃,进样体积5 μL,进样器温度4 ℃;质谱条件:采用电喷雾离子源(ESI⁺),选择多反应监测模式(MRM)进行定量分析,检测离子对分别为m/z 823.4→453.3(甘草酸)、m/z 471.4→189.0(甘草次酸)和m/z 464.3→447.1(IS)。结果: 血浆中甘草酸和甘草次酸质量浓度分别在0.5~80 ng·mL^-1和2~800 ng·mL^-1范围内线性关系良好(r＞0.99),最低定量浓度分别为0.5 ng·mL^-1和2 ng·mL^-1。批内、批间精密度(RSD)均＜6.8%,准确度在92.3%~104.2%;甘草酸和甘草次酸的提取回收率分别约为28.0%和40.0%,IS的提取回收率约为65%,RSD均小于7.9%;甘草酸和甘草次酸的内标归一化基质因子均约为1,RSD均小于7.3%。结论: 该方法灵敏、准确、简便、快速,可用于人血浆中甘草酸及甘草次酸的同时测定。

目的: 建立一种双衍生法-结合串联质谱技术同时检测人血清中18种类固醇激素的方法。方法: 血清样本采用羟胺和1,2-二甲基咪唑-5-磺酰氯对进行衍生处理,采用液相色谱-串联质谱法正离子选择离子监测模式(SRM)下检测,色谱柱为Kinetex^®C₈(100 mm×2.1 mm,2.6 μm),以0.1%甲酸水溶液为流动相A, 0.1%甲酸甲醇溶液为流动相B,梯度洗脱(0~0.5 min,35%B;0.5~5 min,35%B→100%B;5.0~5.1 min,100%B→35%B;5.1~7 min,35%B),柱温40 ℃,流速0.4 mL·min^-1,进样量20 μL,采集时间为6 min。结果: 18种类固醇激素的线性相关系数均>0.99,回收率均在85%~115%,精密度RSD均＜15%。用该方法成功地检测了156份健康人群受试者血清样本(男性75例,女性61例)并制定了参考区间。结论: 该方法可用非固相萃取法同时检测孕烯醇酮、17-羟孕烯醇酮、孕酮、17-羟孕酮、皮质酮、皮质醇、11-脱氧皮质醇、21-脱氧皮质醇、醛固酮、睾酮、雄烯二酮、脱氢表雄酮、硫酸脱氢表雄酮、皮质素、18-羟皮质酮、雌酮、雌二醇、雌三醇等18种类固醇激素。

目的: 建立基于人白血病T细胞株Jurkat E6-1的转移因子(TF)生物活性检测方法。方法: 采用细胞毒性和增殖(CCK-8)法探索不同浓度TF对6-巯基嘌呤(6-MP)处理Jurkat E6-1细胞增殖的影响,并对该方法的精密度进行验证。结果: 20 μg·mL^-1 TF可使细胞的生存率明显提高,使6-MP的 IC₅₀由(0.46±0.10)μg·mL^-1右移至(1.11±0.30)μg·mL^-1;当1.0 μg·mL^-1 6-MP处理细胞时,TF的浓度和细胞生存率具有良好的线性关系,r>0.95。不同批次间在剂量-反应曲线的每个浓度水平上,RSD均小于20%。TF的半数有效浓度(EC₅₀)为(28.49±9.60)mg·mL^-1,可信限率小于20%。结论: TF可以显著提高暴露于6-MP的Jurkat E6-1细胞生存率,该作用呈剂量依赖性,可为TF生物活性测定提供客观、准确的评价手段。

目的: 建立基于环介导等温扩增技术(LAMP)的地鳖分子鉴定方法。方法: 针对地鳖COⅠ序列设计特异性引物2对(外引物DB-F3、DB-B3和内引物DB-FIP、DB-BIP),在含有Bst DNA聚合酶和甲基红-苯酚红指示剂的反应体系下于63 ℃下恒温扩增90 min,通过目测检视判断反应结果,与DNA条形码和聚合酶链式反应(PCR)鉴定方法进行对比,考察方法专属性和灵敏度。结果: 11批地鳖样品均由紫红色变为橙黄色,1批冀地鳖、9批金边土鳖和1批伪品龙虱均为紫红色,鉴别结果与DNA条形码,PCR结果一致, LAMP检出限为0.984 ng·mL^-1。结论: 本项目建立的LAMP检测方法准确,灵敏度高,操作简便快捷,对设备要求低,可应用于地鳖鉴别的快速筛查。

目的: 采用多组分分析法研究百合地黄汤古代与现代临床组方化学成分差异。方法: 采用蒽酮-硫酸-紫外分光光度计法在580 nm紫外光下对百合地黄汤多糖提取液进行测定。采用高效液相色谱串联电喷雾检测器(UPLC-CAD),使用Agilent Infinity Lab Poroshell 120 HILIC-Z(3.0 mm×100 mm,2.7 μm)色谱柱,流动相A为0.2%氨水-乙腈,流动相B为0.2%氨水-纯水,梯度洗脱,流速0.8 mL·min^-1,柱温为35 ℃,CAD检测器雾化器温度70 ℃,分别对百合地黄汤古代方和现代方中6个单、寡糖成分进行定量分析。采用高效液相色谱-四极杆串联飞行时间质谱(UPLC-Q TOF MS/MS)及高效液相色谱串联三重四极杆质谱(UPLC-QQQ MS),分析百合地黄汤古代方与现代方的差异性成分,并对9个差异性成分进行定量分析。结果: 百合地黄汤多糖与6个单寡糖及9个差异性成分在各自的测定范围内线性关系良好(r＞0.999),平均加样回收率在97.7%~104.9%,RSD≤3.1%。精密度、重复性、稳定性均符合要求。结果表明百合地黄汤古代方与现代方的多糖、单寡糖含量以及9个差异性成分含量均具有显著性差异(P＜0.05)。结论: 本实验从多种化学成分角度明确了百合地黄汤古、今组方的差异。所采用方法均准确灵敏,稳定性和重复性好,可为百合地黄汤的临床应用与高品质中药制剂的开发提供参考。

目的: 分析陕产黄精根茎和叶中化学成分的差异。方法: 采用超高效液相色谱-四级杆/静电场轨道阱高分辨质谱(UPLC-Q-Orbitrap HRMS)法检测陕产黄精根茎和叶的化学成分,所得数据采用主成分分析(PCA)法与正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)处理,陕产黄精根茎和叶的差异指标成分,通过精准的一级质谱质荷比和二级质谱碎片离子,同对照品图谱和软件数据库搜索,以及相关文献报道成分进行判别分析。结果: 共鉴定得到45个成分,通过OPLS-DA,筛选出根茎和叶之间差异性化学成分26个,包括氨基酸类10个,黄酮类6个,有机酸类3个,糖类2个,香豆素类1个,生物碱类4个。结论: 陕产黄精氨基酸类、有机酸类、生物碱类差异成分主要分布于根茎部,而黄酮类差异成分主要集中于叶部,为陕产黄精资源的综合利用提供了理论依据。

目的: 依据对青蛙七主要成分的表征结果,建立青蛙七薄层色谱(TLC)定性鉴别方法及一测多评(QAMS)的含量测定方法。方法: 首先,采用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱联用(UPLC-Q TOF MS/MS)技术对青蛙七的主要成分进行表征,使用ACQUITY UPLC^®BEH C₁₈(100 mm×2.1 mm,1.7 μm)色谱柱,以0.1%甲酸水溶液(A)-乙腈溶液(B)为流动相进行梯度洗脱,正离子模式下采集信息;其次,通过TLC建立定性鉴别方法;最后,建立QAMS方法,采用Agilent 5 TC-C₁₈(250 mm×4.6 mm,5 μm)色谱柱,流动相为0.05%磷酸水(A)-乙腈(B),梯度洗脱,以鸢尾黄素为内参物,建立其与鸢尾苷及野鸢尾黄素的相对校正因子,并通过校正因子计算3个异黄酮类成分的含量。同时与外标法(ESM)进行比较,以验证QAMS法的准确性和可行性。结果: UPLC-Q TOF MS共表征出青蛙七中5个含量较高的异黄酮类成分(鸢尾苷、鸢尾甲苷B、鸢尾黄素、野鸢尾黄素、鸢尾黄酮A)。建立了鸢尾苷、鸢尾甲苷B、鸢尾黄素、野鸢尾黄素4个成分的TLC鉴别法。在一定的浓度范围内,鸢尾苷、鸢尾黄素、野鸢尾黄素3个成分线性关系良好(r﹥0.999),平均加样回收率为97.7%~100.8%,RSD为1.1%~2.9%,鸢尾苷、野鸢尾黄素的相对校正因子分别为1.114 5、0.827 0,在不同试验条件下重现性良好(RSD<5%);采用QAMS法测定的10个不同产地青蛙七中3个成分含量与ESM的实测值之间无显著性差异。结论: 以表征的青蛙七药材的成分为基础,选择含量较高且稳定的成分建立的TLC和QAMS方法简便、稳定,可用于青蛙七药材定性定量分析及质量评价。

目的: 建立生物传感技术集成模式生物斑马鱼研究方法,实现盐酸西替利嗪、盐酸非索非那定、咪唑斯汀、依巴斯汀4种抗组胺药物与过敏性鼻炎关键靶点巨噬细胞迁移抑制因子(MIF)相互作用及验证研究。方法: 以砷化镓(AlGaAs/GaAs)高电子迁移率晶体管( HEMT)半导体材料为传感元件, MIF为生物元件,构建MIF-HEMT生物传感器,开展盐酸西替利嗪、盐酸非索非那定、咪唑斯汀、依巴斯汀与MIF相互作用的强度表征。进一步建立斑马鱼免疫炎症模型,记录空白组、模型组、阳性药组和低、中、高剂量药物组中性粒细胞迁移数目,计算药物炎症抑制率。结果: 盐酸西替利嗪与MIF的结合能力最强,解离常数K_D值达7.05×10^-13 mol·L^-1,盐酸非索非那定、咪唑斯汀、依巴斯汀与MIF作用的解离常数K_D值分别为2.34×10^-8、1.94×10^-7和2.44×10^-8 mol·L^-1,均与MIF有结合作用。进一步采用斑马鱼免疫炎症模型进行验证,发现4种抗组胺药均能显著减少中性粒细胞迁移数量,其中100 μmol·L^-1盐酸西替利嗪对中性粒细胞迁移抑制率达到68.5%。结论: 本研究通过生物传感技术集成模式生物斑马鱼实验,实现了抗组胺药物与过敏性鼻炎关键靶点MIF相互作用研究,进一步验证了MIF是抗组胺药物发挥药效的潜在靶点,为药物疗效与作用靶点关联研究提供了重要参考。

目的: 分析麸炒僵蚕汤剂的多肽组成,并虚拟筛选具有GAT-1结合活性的抗癫痫多肽。方法: 利用基于微升流速液相色谱-质谱联用(μLC-MS/MS)的多肽组学技术,对麸炒僵蚕汤剂的多肽成分进行广泛鉴定,通过生物信息学和计算机模拟虚拟筛选潜在的抗癫痫活性肽,包括生物活性预测、血脑屏障通透性预测、毒性预测和分子对接,最后,利用分子动力学模拟分析多肽和靶蛋白的相互作用。结果: 从麸炒僵蚕汤剂中共鉴定得到384条多肽,从中虚拟筛选出19条结合亲和力高于对照药物的潜在抗癫痫活性多肽,其中,多肽FDHFDFDAF的结合亲和力最高,其次是EHYAWGIK,2条多肽主要通过氢键、疏水和静电相互作用与GAT-1结合,分子动力学模拟研究验证了FDHFDFDAF和EHYAWGIK与GAT-1的结合稳定性。结论: 基于多肽组学和计算机虚拟筛选技术有利于快速发现动物药的活性多肽成分,本研究对麸炒僵蚕汤剂抗癫痫活性多肽的研究有着重要参考价值,同时为动物药多肽成分研究提供新思路。

目的: 研究中药丸剂生产全链条的微生物负载情况。方法: 选取一种中药丸剂处方的药材及其净药材、中间体(混合药粉、待内包丸)和成品作为研究对象,按照2020年版《中华人民共和国药典》(简称《中国药典》)微生物限度检查法进行方法建立,对全链条收集的样品进行微生物检测鉴定,分析中药丸剂从药材到成品的微生物负载传递。结果: 不同药材的微生物含量差异较大,药材微生物污染风险因子较高的品种为紫苏叶、广藿香和白芷。紫苏叶和广藿香“药材-净药材”的生产工艺需要改进和调整。药材微生物负载与中间体和成品呈现明显的正相关系。结论: 对中成药生产全链条微生物负载的研究,了解各环节微生物的传递情况,有助于发现生产过程的薄弱环节和工艺控制的关键点,对中成药生产企业改进和探索生产工艺有着重要的指导意义。

目的: 根据方法适用性试验结果,对微生态活菌制品的杂菌检查方法进行分类,并建立微生态活菌制品杂菌检查决策方法。方法: 按《中华人民共和国药典》(简称《中国药典》)四部<通则1105计数方法适用性试验>(简称<通则1105>要求),以大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、铜绿假单胞菌、白色念珠菌和黑曲霉为试验菌,采用胰酪大豆胨琼脂培养基、沙氏葡萄糖琼脂培养基、孟加拉红琼脂培养基、玫瑰红钠琼脂培养基,对已上市微生态活菌制品进行杂菌检查方法适用性试验。结果: 成分为厌氧菌或生长特性与试验菌差别较大微生物的制品,可参照《中国药典》四部<通则1105>进行方法适用性试验;成分中含有芽孢杆菌和肠球菌的制品,真菌计数可参照《中国药典》四部<通则1105>进行方法适用性试验;受成分菌的影响,非致病性杂菌无法通过方法适用性试验的产品,可采用选择性培养基对革兰阴性杆菌进行控制;无法通过计数方法适用性试验的制品,可根据给药途径、用药人群等,基于风险评估后,控制部分有潜在危害的微生物。结论: 本研究为微生态活菌制品的杂菌检查方法提供了选择依据,进一步补充完善了微生态活菌制品的质量标准体系。

目的: 气相色谱-质谱联用(GC-MS)法结合保留指数比较不同方法提取羊红膻挥发油成分异同。方法: 采用水蒸气蒸馏法、盐析辅助水蒸气蒸馏法、酶解辅助水蒸气蒸馏法提取羊红膻挥发油,通过GC-MS结合保留指数分析上述不同方法提取挥发油的化学成分,并采用峰面积归一化法计算挥发油成分相对含量。结果: 3种提取方法的挥发油提取率大小顺序为酶解辅助水蒸气蒸馏法、盐析辅助水蒸气蒸馏法、水蒸气蒸馏法。盐析辅助水蒸气蒸馏法提取的挥发油种类最多,其次为酶解辅助水蒸气蒸馏法,最后为水蒸气蒸馏法。不同方法提取的羊红膻挥发油主成分种类基本不变,但各类化合物的相对含量有变化。3种方法提取出的挥发油共鉴定出47个化合物,共有化合物35个,主要包括萜烯类、萜醚类、萜醇类、芳香族类和脂肪族类,其中含量较高的化合物有β-红没药烯(17.25%~19.42%)、石竹素(12.90%~15.70%)、1-(3-甲基-2-丁烯氧基)-4-(1-丙烯基)苯(5.02%~9.36%)和β-蒎烯(5.31%~6.62%)。结论: 不同方法提取的羊红膻挥发油的化学成分种类及相对含量有一定的差异,但差异不大。研究结果可为提取羊红膻挥发油选择适宜提取方法及进一步的开发利用提供参考。

目的: 构建人脐静脉细胞膜色谱(HUVEC/CMC)模型,并将其应用于莱菔子中抗血管性疾病活性成分的快速筛选。方法: 采用HUVEC/CMC模型二维在线联用HPLC-ESI IT TOF MS系统对莱菔子活性成分进行分离、筛选和鉴定,并将筛选的活性成分进一步作用于氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的HUVEC,验证其保护作用。结果: 利用所建立的方法从莱菔子中共筛选出2个保留组分,通过与对照品比对,鉴定出1个成分为芥子酸。与模型组比较,芥子酸低、中、高预处理组细胞存活率显著增加,细胞中ICAM-1和VCAM-1的含量下降,并呈剂量依赖性;Bcl-2蛋白表达水平下降、Bax蛋白表达升高,具有统计学意义(P<0.05)。结论: 构建的HUVEC/CMC在线联用HPLC-ESI IT TOF MS系统可用于快速筛选复杂中药体系中活性成分,为细胞膜色谱的应用和莱菔子的开发提供了参考。

目的: 优化并建立一种快速检验血液和尿液中12个苯二氮䓬类药物的实时直接分析串联质谱(direct analysis of real time,DART-MS/MS)方法,使其能够用于法医毒物检验工作。方法: 使用DART离子源与API4000 Q Trap质谱仪联用;装载DART 12Dip-It^TM自动进样模块,模块移动速度为0.6 mm·s^-1,进样量为5 μL,栅极电压为200 V;质谱部分在正离子模式下使用多反应监测(MRM)模式扫描监测。进一步优化DART-MS/MS条件后建立的方法经过方法学验证,并应用于实际案例检材。结果: 选用乙酸乙酯为萃取剂进行液液萃取,优化载气加热器温度;该方法选择性良好,无延迟效应;线性关系良好,血液和尿液中目标物检测限分别在0.5~10 ng·mL^-1和0.2~2 ng·mL^-1,定量限分别在1~50 ng·mL^-1和 0.5~5 ng·mL^-1;回收率在78.8%~119.0%,基质效应在-17.5%~18.5%;高、中浓度的日内、日间精密度与重复性不大于14.4%,定量限不大于18.1%。结论: 该方法快速简便,灵敏度良好,可应用于毒物快速检验研究与工作,提高检验效率。

目的: 建立测定人血浆中FCN-437c药物浓度的HPLC-MS/MS方法,并用于FCN-437c的 Ⅰ 期临床研究。方法: 血浆经蛋白沉淀处理后,采用HPLC-MS/MS法进样测定。色谱柱为YMC Triart PFP柱(50 mm×2.1 mm, 5 μm),以0.5%甲酸水溶液(含5 mmol·L^-1乙酸铵,A)-乙腈(B)为流动相,梯度洗脱,流速为0.5 mL·min^-1,柱温为35 ℃,进样量为2 μL,进样器温度为10 ℃。质谱采用ESI⁺,MRM模式。检测离子反应对为m/z 549.4→449.5(FCN-437c)和m/z 552.5→449.0(FCN-437-D3,氘代内标),雾化气压力276 kPa,辅助气压力207 kPa,去簇电压100 V,碰撞室出口电压25 V。结果: 人血浆中FCN-437c的线性范围为5~1 000 ng·mL^-1(r=0.999 0),定量限为5 ng·mL^-1,批内、批间精密度分别小于2.0%和4.1%,平均回收率为104.0%(FCN-437c)、78.6%(FCN-437-D3),内标归一化基质因子为100%~102%。FCN-437c储备液4 ℃放置202 d,FCN-437c及FCN-437-D3工作液室温放置24 h,血浆样品室温放置20 h、冻融四循环、-20 ℃放置134 d、-80 ℃放置662 d,样品处理后自动进样器放置24 h,全血样品室温放置4 h均稳定。应用此方法检测了受试者口服FCN-437c后血浆药物浓度,ISR样品测试结果为97.0%与初测值的偏差在±20%以内。血浆样本稀释10倍后准确度为102.0%~108.0%。FCN-437c连续给药与单次给药相比,R_AUC0-24和R_Cmax的累积比为1.33倍与1.59倍。结论: 本方法简便、准确、耐用、专属性强,可满足人血浆中FCN-437c的定量分析的要求。

目的: 建立超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)同时测定蔗糖中47种农药残留量的方法。方法: 蔗糖样品经酸性乙腈提取,氮气吹干浓缩,采用LC-MS/MS 进行分析检测,在多反应检测模式(MRM)下,用空白基质标准曲线-内标法进行定量。结果: 各待测物质在一定浓度范围内线性良好(r>0.995),检测限为0.01~2.00 μg·kg^-1。分别在蔗糖样品中添加47 种农药标准溶液10、25、50 μg·kg^-1,进行标准添加回收试验,方法回收率为71.0%~106.0%,重复性RSD为0.90%~8.5%。15批蔗糖样品中2批检出噻虫嗪、噻虫胺,其余均未检出。结论: 该方法具有前处理简单快捷、灵敏、准确等优点,符合农药残留检测要求,满足蔗糖中农药残留检测需要,可用于蔗糖的质量控制。

目的: 建立检测柴胡及藏柴胡中柴胡皂苷K成分的液相色谱-质谱法(LC-MS)检查方法,用以快速鉴别北柴胡是否为藏柴胡或混有藏柴胡。同时对16批藏柴胡和157批柴胡饮片中的柴胡皂苷K进行检测。方法: 采用超高效液相色谱-三重四极杆串联质谱(UPLC-QqQ-MS)对柴胡及藏柴胡中柴胡皂苷K进行检测,色谱柱为Phenomenex Kinetex C₁₈(100 mm×2.1 mm,1.7 μm),流动相为乙腈(A)-水(B),梯度洗脱(0~5 min,15%A→25%A;5~30 min,25%A→30%A;30~35 min,30%A→90%A;35~36 min,90%A→15%A;36~40 min,15%A),流速0.3 mL·min^-1,柱温25 ℃,进样量5 μL;采用电喷雾离子源(ESI^-),负离子模式扫描,多反应监测(MRM)模式检测,选择柴胡皂苷K特征分子离子峰m/z 943.5→797.3、m/z 943.5→635.3和m/z 943.5→781.3作为检测离子对。结果: 16批藏柴胡中柴胡皂苷K的量远高于限度要求,157批柴胡饮片中有8批样品中均检出藏柴胡类成分柴胡皂苷K。结论: 所建立的方法经方法学验证,专属性强,以期制定柴胡中藏柴胡成分检查项补充检验方法,提升柴胡饮片质量控制标准及真伪鉴别研究,可进一步有效控制其质量,保障临床疗效。

目的: 应用往复筒法测定麝香缓释微片的体外释放度。方法: 采用气相色谱法建立缓释微片主要活性成分麝香酮的体外分析方法,比较其在不同浓度吐温-80、十六烷基三甲基溴化铵(CTAB) 及十二烷基硫酸钠(SDS)中的平衡溶解度,确定释放介质的种类,考察停留时间、滴水时间、往复速率和筛网孔径等因素对麝香酮释放行为的影响,并与桨法进行比较,同时对其释药机制进行了初步探究。结果: 所建分析方法线性良好,精密度、重复性、稳定性的RSD均小于3%,加样回收率合格。往复筒法释放介质为0.05%吐温-80 200 mL,停留和滴水时间为20 s,往复速率15 dip·min^-1,上、下筛网目数分别为20和40。与桨法相比,往复筒法中麝香酮在不同pH条件下能完全释放,且释放曲线平稳递增。结论: 本研究可为往复筒法在中药缓释制剂的体外评价提供一定的参考和借鉴。

目的: 建立环孢素眼用乳剂体外释放方法。方法: 采用Franz扩散池,聚偏氟乙烯膜滤膜,以缓冲盐-无水乙醇(40∶60)为接收液,时间点为60、125、190、255、320、385 min。结果: 方法学验证表明,体外释放方法的滤膜惰性、专属性、灵敏度、选择性均符合规定。测定方法的定量限为0.07 μg·mL^-1,在0.07~44.62 μg·mL^-1范围呈现良好的线性关系,回收率为98.9%。依据FDA的判定原则,自研制剂与参比制剂体外释放行为一致。结论: 本法适合环孢素眼用乳剂的体外释放度评价。

促甲状腺激素(thyroid-stimulating hormone,TSH)是由垂体前叶产生的糖蛋白激素。可调节甲状腺滤泡细胞中甲状腺激素的合成和分泌,具有重要生理学意义,作为药物具有重要应用价值,生物学活性检测是评价其质量的有效和必要手段,本文就促甲状腺激素的信号转导作用机理、促甲状腺激素的临床诊断与治疗、生物学活性测定方法进行论述。

治疗性寡核苷酸(oligonucleotides,OGNs)药物是人工化学合成的短单链或双链核酸,长度通常为15~30个碱基对。OGNs作为一种新的治疗药物正在迅速发展,并在各种疾病领域的药物发现和开发中受到越来越多的关注。与欧美相比,除Spinraza (nusinersen)作为孤儿药在中国获批上市外,暂无其他OGNs药物在国内上市。国内OGNs药物开发起步较晚,仍然处于发展初期,但由于国内患者群体基数较大,需求较多,未来伴随OGNs药物开发的持续推进,以及国内企业相应技术的逐步成熟,我国OGNs药物市场有望迎来快速发展。OGNs药物由于其独特的理化性质,生物分析方法开发难度大,目前,国内关于OGNs药物定量分析方法的报道还很少。开发一种灵敏可靠的方法来表征生物样品中的OGNs是研究其药代动力学和药效学性质的关键。相对于传统的ELISA法,LC-MS法可以同时定量完整OGNs及其代谢物,特别是高分辨质谱的广泛应用不仅可以提供目标OGNs的定量信息,还可以对代谢物进行鉴定,提供碱基组成、序列结构等信息,目前已成为OGNs定量分析的首选方法。本文主要描述了LC-MS在治疗性OGNs药物检测中的应用,并阐述了其优点和局限性,最后探讨了LC-MS用于检测OGNs的发展趋势,即更低的检测水平和潜在的通用方法。

目的:建立栝楼桂枝汤(Gualou Guizhi decoction)物质基准指纹图谱和多成分含量测定方法,探究饮片-物质基准关键质量属性的量值传递规律。方法:制备15批栝楼桂枝汤物质基准,采用ChromCore 120 C₁₈ (250 mm×4.6 mm,5 μm)色谱柱,以乙腈(A)-0.1%甲酸水(B)为流动相,进行梯度洗脱,流速0.8 mL·min^-1,柱温30 ℃,检测波长254 nm,采用中药色谱指纹图谱相似度评价软件(2012年版)建立指纹图谱,结合层次聚类分析(hierarchical cluster analysis, HCA)、主成分分析(principal component an alysis, PCA)与正交偏最小二乘法-判别分析(orthogonal partial least squares-discriminant analysis, OPLS-DA),筛选不同批次栝楼桂枝汤物质基准质量差异的主要化学成分。建立HPLC法测定主要差异性成分含量,以含量、出膏率和转移率分析栝楼桂枝汤的量值传递规律。结果:建立了栝楼桂枝汤物质基准HPLC指纹图谱,确定30个共有峰,与对照品比对共指认出其中9个成分,分别为没食子酸、芍药内酯苷、芍药苷、甘草苷、芒柄花苷、甘草素、肉桂酸、异甘草素、甘草酸。15批栝楼桂枝汤物质基准指纹图谱相似度均>0.920。3种化学识别模式均将样品分为2类,造成主要差异化学成分共5个,分别为甘草酸、甘草素、芍药苷、甘草苷、芒柄花苷。建立了多成分HPLC含量测定方法,符合方法学要求。饮片-物质基准之间5个差异成分的平均转移率分别为51.65%、40.46%、74.74%、60.06%、34.54%,平均出膏率为14.20%。结论:栝楼桂枝汤物质基准的关键质量属性在饮片-物质基准间稳定传递。建立的栝楼桂枝汤指纹图谱和含量测定方法准确、可靠,可为栝楼桂枝制剂的质量控制提供技术参考。

目的:建立以环糊精为流动相添加剂的高效液相色谱法测定山茱萸中熊果酸和齐墩果酸,为山茱萸的质量控制提供依据。方法:运用分子设计和效应面法优化山茱萸中熊果酸和齐墩果酸含量测定的方法,采用安捷伦Eclipse XDB C₁₈(150 mm×4.6 mm,5 μm)色谱柱,以乙腈-3 mmol·L^-1 γ-环糊精溶液(含0.05%磷酸)(60∶40)为流动相,流速1.0 mL·min^-1,柱温25 ℃,检测波长210 nm。结果:熊果酸和齐墩果酸的分离度为3.81,熊果酸进样量在400~4 000 ng,齐墩果酸进样量在200~2 000 ng范围内线性关系良好(r=0.999 7和0.999 9),精密度RSD≤1.4%,重现性RSD≤1.8%,稳定性RSD≤1.7%,回收率分别为98.5%(RSD=1.7%)和99.1%(RSD=2.0%),3批山茱萸药材中熊果酸含量分别为2.66、2.35和2.91 mg·g^-1,齐墩果酸含量分别为0.83、0.78和1.12 mg·g^-1。结论:该方法简便,准确可靠,且经济环保,可作为山茱萸的质量控制方法。

目的:建立超高效液相色谱-三重四极杆串联质谱(UPLC-MS/MS)法同时测定小槐花中9个成分(烟酸、山柰酚、当药黄素、槲皮素、木犀草素、芦丁、牡荆素、斯皮诺素、水杨酸)的含量并构建BP(back propagation)神经网络模型对不同产地的小槐花进行产地预测。方法:采用安捷伦ZORBAX SB-C₁₈(50 mm×3.0 mm,1.8 μm)色谱柱,以0.1%乙酸(含0.02 mol·L^-1乙酸铵)水溶液(A)-甲醇(B)为流动相,梯度洗脱,体积流量0.3 mL·min^-1。质谱采用ESI正负离子检测模式,多反应监测模式(MRM)的扫描模式。测得各成分含量进行相关性分析,并构建BP神经网络模型用于进行不同产地的小槐花药材的溯源。结果:小槐花中烟酸、山柰酚、当药黄素、槲皮素、木犀草素、芦丁、牡荆素、斯皮诺素、水杨酸9个成分质量浓度分别在0.388 8~38.88、10.07~1 006.6、34.22~34 221.6、3.944~394.4、2.124~212.4、4.344~434.4、46.50~4 650.1、1.649~164.9、4.880~488.0 ng·mL^-1范围内线性关系良好(r＞0.995 1),平均加样回收率96.9%~103.9%,RSD均＜1.9%。40批小槐花中烟酸、山柰酚、当药黄素、槲皮素、木犀草素、芦丁、牡荆素、斯皮诺素、水杨酸9个成分的含量分别为1.657~7.407、15.801~64.488、1 068.348~4 270.780、10.608~123.228、3.897~16.802、1.269~97.834、405.285~1 955.796、13.614~36.124、4.417~87.509 μg·g^-1。通过相关性分析可知,当药黄素、芦丁、斯皮诺素、木犀草素4个成分相互呈高度线性正相关,表明小槐花中这4个成分具有一定互相协同的作用。构建BP神经网络模型用于预测不同产地的小槐花样品,检验集的正确率达到92.3%。结论:试验建立的方法简便、灵敏、高效,可用于小槐花成分的快速测定,结合BP神经网络模型对产地进行预测在小槐花产地的溯源中有一定作用。