目的：建立超高效液相色谱法快速测定婴儿维生素D₃滴剂、维生素D₃片、维生素AD滴剂及维生素D₂片中维生素D₃和维生素D₂。方法：选用乙醇提取样品中的维生素D₃和维生素D₂，40℃超声提取3次，每次30 min，进样5 μL分析；色谱条件：采用Acquity UPLC BEH C₁₈色谱柱（2.1 mm×50 mm，1.7 μm），流动相为0.5%甲酸-乙腈，梯度洗脱，流速0.3 mL·min^-1，柱温30℃，检测波长264 nm。结果：维生素D₃线性范围为0.10～100.00 μg·mL^-1，相关系数为0.999 9，婴儿维生素D₃滴剂、维生素D₃片、维生素AD滴剂3种样品中维生素D₃的平均回收率（n=6）分别为96.40%、96.84%和93.59%；维生素D₂线性范围为0.50～100.00 μg·mL^-1，相关系数为0.999 8，维生素D₂片中维生素D₂的平均回收率（n=6）为92.14%；分析周期均在5 min以内。采用本法对婴儿维生素D₃滴剂、维生素D₃片、维生素AD滴剂及维生素D₂片4种维生素D复配保健食品和药品的测定含量分别为其标示量的89.20%、99.64%、90.59%和88.60%，且与传统方法（GB 5413.9-2010）测定结果在5%水平无显著差异（P>0.05）。结论：本法经方法学验证，适用于维生素D₃滴剂、维生素D₃片、维生素AD滴剂及维生素D₂片中维生素D₃和维生素D₂的含量测定。